轉(zhuǎn)鐵蛋白和血紅蛋白聯(lián)合檢測(cè)消化道出血的臨床應(yīng)用-醫(yī)學(xué)論文

　　便隱血試驗(yàn)（OBT）是指消化道出血量少，肉眼不見(jiàn)血色，而且少量紅細(xì)胞又被消化分解，以至顯微鏡下也無(wú)從發(fā)現(xiàn)的出血[1-3]。正常人糞便隱血試驗(yàn)為陰性。其陽(yáng)性常見(jiàn)于消化性潰瘍的活動(dòng)期、胃癌、鉤蟲(chóng)病以及消化道炎癥、出血性疾病等；消化性潰瘍呈間斷陽(yáng)性，消化道癌癥呈持續(xù)性陽(yáng)性，故本試驗(yàn)對(duì)消化道出血的診斷及消化道腫瘤的普查、初篩和監(jiān)測(cè)均有重要意義[4]。目前主要采用化學(xué)法、單克隆抗體法，但血紅蛋白由于受到腸內(nèi)細(xì)菌的作用及大腸黏膜產(chǎn)生的黏液成分影響而變性，常出現(xiàn)假陰性反應(yīng)。有報(bào)道指出應(yīng)用聯(lián)合免疫法同時(shí)測(cè)定血紅蛋白和轉(zhuǎn)鐵蛋白，對(duì)消化道出血性疾病的陽(yáng)性檢出率有顯著提高。本文對(duì)聯(lián)合免疫法、血紅蛋白法（OB）、轉(zhuǎn)鐵蛋白法（TF）檢測(cè)便隱血的3種方法進(jìn)行比較。現(xiàn)報(bào)道如下：

　　1 材料與方法

　　1.1 材料

　　1 944例糞便標(biāo)本，均來(lái)自廣州醫(yī)學(xué)院第三附屬醫(yī)院就診的患者，其中，男917例，女1 027例；年齡0~82歲。消康保便隱血試紙和轉(zhuǎn)鐵蛋白膠體金診斷試紙購(gòu)自萬(wàn)華普曼生物工程有限公司。

　　1.2 方法

　　1.2.1 血紅蛋白的檢測(cè) 用采便棒采集便樣后，將其放入裝有緩沖液的小試管中，充分混勻便樣；撕開(kāi)鋁錫箔袋，取出試紙條；將試紙標(biāo)有MAX箭頭的一端插入待測(cè)樣本中，待測(cè)標(biāo)本界面不得超過(guò)MAX線；5 min內(nèi)判讀結(jié)果。在反應(yīng)線和控制線同時(shí)出現(xiàn)一條色帶，代表OB陽(yáng)性，提示標(biāo)本有隱形出血；在控制線出現(xiàn)一條色帶，反應(yīng)線無(wú)色帶出現(xiàn)，則為陰性，即提示標(biāo)本無(wú)隱性出血；在控制線和反應(yīng)線均無(wú)色帶出現(xiàn)，或在反應(yīng)線出現(xiàn)一條色帶，表明試驗(yàn)無(wú)效。血紅蛋白的檢測(cè)范圍為0.2~2 000.0 μg/mL。

　　1.2.2 轉(zhuǎn)鐵蛋白的檢測(cè) 方法同上，其中轉(zhuǎn)鐵蛋白的檢測(cè)范圍為40 ng/mL~400 μg/mL。

　　1.2.3 聯(lián)合檢測(cè)法 OB法和TF法有任何一項(xiàng)為陽(yáng)性，聯(lián)合檢測(cè)法即為陽(yáng)性。

　　1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

　　采用SPSS 11.0統(tǒng)計(jì)軟件建立數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析處理，計(jì)數(shù)資料以百分率表示，采用χ2檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

　　2 結(jié)果

　　其中，TF法的陽(yáng)性率明顯高于OB法，差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2 = 20.38，P < 0.01），聯(lián)合檢測(cè)法的陽(yáng)性率明顯高于OB法，差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2 = 36.01，P < 0.01）。雖然聯(lián)合檢測(cè)法的陽(yáng)性率（11.11%）略高于TF法的陽(yáng)性率（9.62%），但兩者陽(yáng)性率比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2 = 2.33，P =0.127 ＞0.05）。見(jiàn)表1。

　　表1 3種方法陽(yáng)性率的比較（例）

　　 注：與OB法比較，*P =0 

　　3 討論

　　轉(zhuǎn)鐵蛋白的檢測(cè)對(duì)于消化道出血的診斷有很重要的參考價(jià)值[5]?，F(xiàn)在常規(guī)檢查方法是化學(xué)法和免疫法?；瘜W(xué)法方法種類(lèi)繁多，但試驗(yàn)原理基本相同，都是基于血紅蛋白中的含鐵血黃素部分有催化過(guò)氧化物分解的作用，能催化試劑中的過(guò)氧化氫，分解釋放新生態(tài)氧，氧化上述色原物質(zhì)而呈色，顏色的深淺反映了血紅蛋白的多少[6]。免疫法檢測(cè)的指標(biāo)一般是人血紅蛋白或人紅細(xì)胞基質(zhì)，所用抗體是抗人血紅蛋白抗體或抗人紅細(xì)胞基質(zhì)抗體，檢測(cè)人血紅蛋白可檢出消化道任何部位的出血，檢測(cè)人紅細(xì)胞基質(zhì)只能檢出下消化道出血。但是血紅蛋白由于受到腸內(nèi)細(xì)菌的作用及大腸黏膜產(chǎn)生的黏液成分的影響而變性，易出現(xiàn)假陰性反應(yīng)。轉(zhuǎn)鐵蛋白膠體金診斷試紙用來(lái)檢測(cè)糞便中的轉(zhuǎn)鐵蛋白，可以排除以上方法的缺點(diǎn)，不僅有較好的特異性和靈敏度，還對(duì)消化道出血者陽(yáng)性率有顯著的提高[7]。

　　在糞便的形成過(guò)程中，少量的消化道出血不一定與之混合均勻，而且消化道出血具有間斷性，所以要連續(xù)3次檢測(cè)以獲得更為準(zhǔn)確的結(jié)果，只要一次結(jié)果為陽(yáng)性，就可認(rèn)為有隱形性出血存在。免疫法檢測(cè)便隱血的結(jié)果呈陽(yáng)性，可能由于以下干擾情況導(dǎo)致，如牙齦、口鼻腔出血，月經(jīng)出血、某些藥物（如阿司匹林）刺激胃腸道造成的出血，應(yīng)引起臨床醫(yī)生的注意[8]。

　　出現(xiàn)柏油樣便時(shí)，血紅蛋白濃度超出2 000 μg/mL檢測(cè)范圍可能會(huì)因?yàn)榍皽磻?yīng)出現(xiàn)假陰性結(jié)果，此時(shí)需要充分稀釋便樣后再進(jìn)行測(cè)試。隨著社會(huì)環(huán)境的改變、工作壓力增大、食品添加劑的應(yīng)用、藥品的使用和飲食習(xí)慣的改變，上、下消化道的感染、損傷、腫瘤和胃腸不適所致的出血病例有所增加。單純的血紅蛋白單克隆抗體法檢測(cè)糞便隱血試驗(yàn)有一定的局限性，對(duì)于十二指腸及胃以上部位的上消化道出血?jiǎng)t會(huì)出現(xiàn)假陰性結(jié)果。因?yàn)檠t蛋白在消化道存留時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，可能被胃酸或腸道內(nèi)細(xì)菌分泌的酶所降解或破壞，使其免疫原性減弱或出現(xiàn)假陰性的結(jié)果[9-11]，此時(shí)應(yīng)增加樣本濃度檢測(cè)或者連續(xù)檢測(cè)3次，并結(jié)合臨床進(jìn)行判斷?，F(xiàn)我科開(kāi)展的金標(biāo)法測(cè)定糞便中轉(zhuǎn)鐵蛋白隱血試驗(yàn)，兩法聯(lián)用，填補(bǔ)了血紅蛋白法測(cè)定的缺陷，減少了上消化道出血病例的漏診[12]。

　　就像其他檢驗(yàn)方法一樣，便隱血試驗(yàn)不能對(duì)胃腸道出血性疾病做出結(jié)論性診斷，只能作為篩選或輔助診斷用，但是不能代替臨床內(nèi)窺鏡、X線片和其他檢查。對(duì)于陽(yáng)性結(jié)果，應(yīng)結(jié)合臨床做進(jìn)一步的檢查。